6. Postup
6.1 Doporučené chromatografícké podmínky
6.1.1 Materiál kolony: sklo
délka: 150 cm
vnitřní průměr: 4 mm
vnější průměr: 6 mm
6.1.2 Kolona se naplní Porapakem Q, Chromosorbem 101 nebo ekvivalentní náplní, 80 až 100 mesh (4.1).
6.1.3 Detektor: plamenový ionizační, citlivost se nastaví tak, aby při nástřiku 3 μl roztoku 4.7 činila výška píku acetonitnlu asi tři čtvrtiny celé škály zapisovače.
6.1.4 Plyny:
Nosný plyn: dusík, průtok 65 ml/min.
Pomocný plyn: vodík, vzduch nebo kyslík
Průtok plynů do detektoru se nastaví tak, aby průtok vzduchu nebo kyslíku byl pěti- až desetinásobkem průtoku vodíku.
6.1.5 Teplota:
nástřik 210 °C
detektor 210 °C
kolona 175 °C
6.1.6 Rychlost posuvu papíru:
asi 100 cm za hodinu.
6.2 Příprava vzorku
Vzorek k analýze se odebere z dosud neotevřené tuby. Vytlačí se jedna třetina obsahu, tuba se uzavře, obsah se důkladně promíchá a odebere se zkušební vzorek.
6.3 Kvantitativní stanovení
6.3.1 Do zkumavky se šroubovým uzávěrem (5.6) se naváží s přesností na 10 mg 6 až 7 gramů zubní pasty
(M gramů)
0
podle bodu 6.2 a přidají se tři malé skleněné kuličky.
6.3.2 Do zkumavky se odpipetuje přesně 5 ml roztoku vnitřního standardu (4.6), 4 ml dimethylformamidu (4.4) a 1 ml methanolu (4.5), zkumavka se uzavře a obsah se promíchá.
6.3.3 Uzavřená zkumavka se vloží na půl hodiny do třepačky a poté se 15 minut odstřeďuje při otáčkách, při nichž dojde ke zřetelnému oddělení fází.
Poznámka: Občas dojde k tomu, že po odstředění je kapalná fáze stále zakalená. Určitého zlepšení lze dosáhnout přidáním 1 až 2 gramů chloridu sodného ke kapalné fázi a novým odstředěním po usazení.
6.3.4 3 μl tohoto roztoku (6.3.3) se nastříknou za podmínek popsaných v bodě 6.1. Postup se opakuje. Za výše uvedených podmínek mohou být vodítkem tyto retenční časy:
methanol přibližně 1 min.,
acetonitril přibližně 2,5 min.,
chloroform přibližně 6 min.,
dimethylformamid > 15 min.
6.3.5 Stanovení faktoru relativní odezvy
Pro stanovení tohoto faktoru se nastříknou 3 μl roztoku podle bodu 4.7. Postup se opakuje. Faktor relativní odezvy se stanovuje každý den.