6. Postup
6.1 Příprava vzorku
Do odměrné baňky na 100 ml se odváží od 0,1 až 0,3 g vzorku přesně (p gramů). Obsah se rozpustí v ethanolu (4.3), přidá se 1 ml roztoku vnitřního standardu (4.5) a doplní po rysku ethanolem.
6.2 Chromatografické podmínky
6.2.1 Provozní podmínky musí dávat rozlišovací faktor R ≥ 1,5.
d'R - d'R
2 1
R = 2 -----------
W + W
1 2
kde
R a R = retenční časy píků v min.,
1 2
W a W = šířky píků v polovině výšky píků v mm,
1 2
d' = rychlost posuvu papíru v mm/min.
6.2.2 Požadované rozlišení poskytnou například následující provozní podmínky:
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Kolona | I | II |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Materiál | Sklo | Nerezová ocel |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Délka | 1,8 m | 3 m |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Průměr | 3 mm | 3 mm |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Stacionární fáze | 10 % Carbowax 20 M TPA | 5 % OV 17 na Chromosorbu |
| | na Gaschromu Q 80 - 100 | WAW DMCS 80 - 100 |
| | mesh | mesh |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Kondicionování | 2 až 3 dny při 190 °C | |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Teplota: | | |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| - nástřik | 200 °C | 150 °C |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| - kolona | 150 °C | 100 °C |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| - detektor | 200 °C | 150 °C |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Nosný plyn | Dusík | Argon/methan (95/5 V/V) |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
| Průtok | 35 ml/min | 35 ml/min |
+------------------+-------------------------+--------------------------+
6.3 Kalibrační křivka
Do pěti odměrných baněk na 100 ml se odměří 1 ml standardního roztoku (4.5) a 0,2, 0,3, 0,4, 0,5 nebo 0,6 ml roztoku 4.4, objem se doplní po rysku ethanolem (4.3) a promíchá. Do chromatografu se nastříkne po 1 μl každého z těchto roztoků za provozních podmínek popsaných v bodě 6.2.2 a kalibrační křivka se sestrojí vynesením poměru hmotností chlorbutanolu a 2,2,2-trichlorethanolu na osu x a poměru odpovídajících ploch píků na osu y.
6.4 Nastříkne se 1 μl roztoku připraveného v bodě 6.1 a postupuje se podle podmínek popsaných v bodě 6.2.2.