4. Použité chemikálie
Všechny použité chemikálie musí být čistoty p. a. nebo vyšší a podle potřeby musí být vhodná pro HPLC.
4.1 Methanol
4.2 4-Ethoxyfenol
4.3 Benzylalkohol
4.4 Mobilní fáze: methanol (4.l)/voda (45:55; V/V)
4.5 Zásobní roztok benzylalkoholu: do odměmé baňky na 100 ml se přesně naváží asi 0,1 g benzylalkoholu (4.3). Doplní se po rysku methanolem (4.l) a promíchá.
4.6 Zásobní roztok vnitřního standardu: do odměrné baňky na 100 ml se naváží asi 0,1 g 4-ethoxyfenolu (4.2) přesně. Doplní se po rysku methanolem (4.l) a promíchá.
4.7 Standardní roztoky: Do série odměrných baněk na 25 ml se odpipetuje zásobní roztok benzylalkoholu (4.5) a zásobní roztok vnitřního standardu (4.6) podle níže uvedené tabulky. Doplní se po rysku methanolem (4.l) a promíchá.
+------------+-----------------------------+-----------------------------+
| Standardní | Koncentrace | Koncentrace |
| roztok | benzylalkoholu | 4-ethoxyfenolu |
| +-----------------+-----------+-----------------+-----------+
| | počet přidaných | μg/ml *) | počet přidaných | μg/ml *) |
| | ml (4.5) | | ml (4.6) | |
+------------+-----------------+-----------+-----------------+-----------+
| I | 0,5 | 20 | 2,0 | 80 |
+------------+-----------------+-----------+-----------------+-----------+
| II | 1,0 | 40 | 2,0 | 80 |
+------------+-----------------+-----------+-----------------+-----------+
| III | 2,0 | 80 | 2,0 | 80 |
+------------+-----------------+-----------+-----------------+-----------+
| IV | 3,0 | 120 | 2,0 | 80 |
+------------+-----------------+-----------+-----------------+-----------+
| V | 4,0 | 200 | 2,0 | 80 |
+------------+-----------------+-----------+-----------------+-----------+
*) Tyto hodnoty jsou uvedeny jako ukazatele a odpovídají koncentracím standardních roztoků připravených z roztoků benzylalkoholu (4.5) a 4-ethoxyfenolu (4.6), které obsahují přesně 0,1 % (m/V) benzylalkoholu a přesně 0,1 % (m/V) 4-ethoxyfenolu.