2. Použité chemikálie
2.1 Všechny použité chemikálie musí být čistoty p. a. nebo vyšší a musí být vhodná pro HPLC. Musí být použita destilovaná voda nebo voda alespoň ekvivalentní čistoty.
2.2 Ethanol, absolutní
2.3 Kyselina 4-hydroxybenzoová
2.4 Kyselina salicylová
2.5 Kyselina benzoová
2.6 Kyselina sorbová
2.7 Octan sodný,
(CH COONa . 3H O)
3 2
2.8 Kyselina octová,
20
d = 1,05 g/ml
4
2.9 Acetonitril
2.10 Kyselina sírová, 2 mol/l
2.11 Hydroxid draselný, 0,2 mol/l vodný roztok
2.12 Kyselina 2-methoxybenzoová
2.13 Směs ethanol/voda
Devět dílů ethanolu (2.2) se smíchá s jedním dílem vody (2:1)
2.14 Roztok vnitřního standardu
Připraví se roztok obsahující 1 g kyseliny 2-methoxybenzoové (2.12) v 500 ml směsi ethanol/voda (2.13).
2.15 Mobilní fáze pro HPLC
2.15.1 Acetátový tlumivý roztok: do 1 litru vody se přidá 6,35 g octanu sodného (2.7) a 20,0 ml kyseliny octové (2.8) a smíchá se.
2.15.2 Mobilní fáze se připraví smícháním devíti dílů acetátového tlumivýho roztoku (2.15.1) a jednoho dílu acetonitrílu (2.9).
2.16 Zásobní roztok konzervantů
Do odměrné baňky na 50 ml se naváží asi 0,05 g kyseliny 4-hydroxybenzoové (2.3), 0,2 g kyseliny salicylové (2.4), 0,2 g kyseliny benzoové (2.5) a 0,05 g kyseliny sorbové (2.6) přesně a objem se doplní směsí ethanol/voda (2.13). Roztok se uchovává v ledničce. Roztok je stabilní jeden týden.
2.17 Standardní roztoky konzervantů
Do odměrných baněk na 20 ml se odměří 8,00; 4,00; 2,00; 1,00 a 0,50 ml zásobního roztoku (2.16). Do každé banky se přidá 10,00 ml roztoku vnitřního standardu (2.14) a 0,5 ml 2 mol/l kyseliny sírové (2.10). Objem se doplní směsí ethanol/voda (2.13). Tyto roztoky musí být připravovány čerstvé.