Dodatek 1
Postup testování
1. Jak bylo uvedeno v bodu 1.4.2.3, výchozí dávka by měla být ta ze tří pevně stanovených dávkových úrovní, která pravděpodobně způsobí uhynutí aspoň u některých zvířat. Pro výběr výchozí dávky lze použít následující informace:
- údaje o fyzikálně-chemických vlastnostech,
- vztah struktury a účinku,
- všechny údaje z jiných testů toxicity a
- předpokládané použití testované látky.
2. Příslušné vývojové diagramy uvedené v tomto dodatku stanovují postup pro každou výchozí dávku. V závislosti na počtu humánně utracených nebo uhynulých zvířat postupuje testování tak, jak naznačují šipky.
3. Pokud po aplikaci výchozí dávky 25 nebo 200 mg.kg-1 tělesné hmotnosti uhyne pouze jedno zvíře druhého pohlaví, obvykle se již dále netestuje. Pokud však přitom nejsou u ostatních 5 zvířat žádné toxické příznaky, je třeba pitvou ověřit možnost, že úmrtí nesouviselo s podanou látkou. Jestliže se tato možnost potvrdí, je třeba pokračovat v testování na vyšší úrovni dávky.
4. Pokud po dávce 2000 mg.kg-1 tělesné hmotnosti uhyne jedno zvíře každého pohlaví, dá se předpokládat, že hodnota LD50 překročí dávku 2000 mg.kg-1 tělesné hmotnosti. Protože je to však jen hraniční výsledek, je třeba pečlivě posoudit reakce zbývajících dvou zvířat každého pohlaví: zřetelné, výrazné toxické příznaky u těchto zvířat mohou být důvodem pro klasifikaci odpovídající hodnotě LD50 ve výši 2000 mg.kg-1 tělesné hmotnosti nebo menší, nebo mohou být podnětem pro další testování na stejné úrovni dávky.
5. Postup umožňuje testování s třemi doplňkovými pevně stanovenými dávkami (varianta 2). Této varianty je možno použít buď k výběru alternativní dávky v daném bodu rozhodovacím procesu, nebo pro další testování po dokončení testování podle varianty 1.
Postup testování s výchozí dávkou 25 mg.kg-1 tělesné hmotnosti
V rámečcích je udána dávka, počet zvířat a pohlaví (1 - pohlaví zvolené jako první, 2 - pohlaví zvolené jako druhé).
Pod rámečky je počet uhynulých nebo utracených zvířat (0, 1, 2, 3). Podle počtu uhynulých zvířat se v testování pokračuje ve směru šipek až do dosažení šedého rámečku.
Varianta 1 - Ukončení testu: Klasifikace se provede na základě konečných hodnot uvedených v příslušném šedém rámečku nebo podle způsobu vyhodnocení uvedeného v Dodatku 2.
Varianta 2 - Pokračování testu s příslušnou doplňkovou dávkou.
Ukončení testu: Klasifikace se provede na základě konečných hodnot uvedených v příslušném šedém rámečku.
Postup testování s výchozí dávkou 200 mg.kg-1 tělesné hmotnosti
V rámečcích je udána dávka, počet zvířat a pohlaví (1 - pohlaví zvolené jako první, 2 - pohlaví zvolené jako druhé).
Pod rámečky je počet uhynulých nebo utracených zvířat (0, 1, 2, 3). Podle počtu uhynulých zvířat se v testování pokračuje ve směru šipek až do dosažení šedého rámečku.
Varianta 1 - Ukončení testu: Klasifikace se provede na základě konečných hodnot uvedených v příslušném šedém rámečku nebo podle způsobu vyhodnocení uvedeného v Dodatku 2.
Varianta 2 - Pokračování testu s příslušnou doplňkovou dávkou.
Ukončení testu: Klasifikace se provede na základě konečných hodnot uvedených v příslušném šedém rámečku.
Postup testování s výchozí dávkou 2000 mg.kg-1 tělesné hmotnosti
V rámečcích je udána dávka, počet zvířat a pohlaví (1 - pohlaví zvolené jako první, 2 - pohlaví zvolené jako druhé.
Pod rámečky je počet uhynulých nebo utracených zvířat (0, 1, 2, 3). Podle počtu uhynulých zvířat se v testování pokračuje ve směru šipek až do dosažení šedého rámečku.
Varianta 1 - Ukončení testu: Klasifikace se provede na základě konečných hodnot uvedených v příslušném šedém rámečku nebo podle způsobu vyhodnocení uvedeného v Dodatku 2.
Varianta 2 - Pokračování testu s příslušnou doplňkovou dávkou.
Ukončení testu: Klasifikace se provede na základě konečných hodnot uvedených v příslušném šedém rámečku.